人类疱疹病毒6型

 

一．发展史

1986年美国国立癌症研究所的Salahuddin等从6名患者(2名HIV阳性的淋巴瘤和淋巴腺炎患者,3名HIV阴性的淋巴癌和淋巴腺炎患者1名HIV阴性的淋巴细胞白血病患者)的未稍血淋巴细胞培养中分离到一种新病毒,因该病毒主要感染的B淋巴细胞，当时命名为人嗜B淋巴细胞的病毒(HBLV)。Lopez和Agut在1988年也于AIDS患者和正常成年人中分离到了类似的病毒，并用交叉杂交试验证实与Sala-huddin所分离到的病毒完全一致。由于病毒形态学上与人疱疹病毒相似,且具有广泛的嗜细胞性，因此Ablashi等建议将其归类于人类疱疹病毒，统称为HHV-6。研究发现,HHV-6的感染与临床上许多疾病有关。相继从幼儿急疹、慢性疲劳综合征、器官移植受者、AIDS、传染性单核细胞增多症等病人体内分离出了HHV-6。且在健康人群中HHV-6的感染也非常普遍.因此HHV-6感染与人类疾病的关系日益受到重视。

 

二．生物学特性

1.分类

HHV-6属于疱疹病毒亚科,玫瑰疹病毒属成员，通过对HHV-6各分离株的相互比较,发现HHV-6病毒形成在分子生物学和生物学性质上存在两组.根据HHV-6基因组的限制性位点多态性的差异，HHV-6分离株被分为HHV-6变异A组(HHV-6A)和HHV-6变异B组（HHV-6B）。研究显示，几乎所有来自玫瑰疹和相关发热性疾病患者的分离株均属HHV-6B。卡波济肉瘤、艾滋病患者中，HHV-6A比HHV-6B更为常见。目前尚无区分两组病毒的血清学方法。

2.形态和结构

HHV-6具有疱疹病毒的典型形态学特征。成熟的、有包膜的病毒体直径为170～200 nm ,内有一电子密度高的,不规则的核心, 直径约为65 nm。核心外依次为衣壳、内膜和包膜。病毒衣壳是由162个壳粒组成的20面体立体对称结构。

3.基因结构

HHV-6基因组为线性双链DNA，基因组全长162～170 kb ,包括143 kb的特异序列片段和2段各10kb的重复序列，共编码119个开放读码框架。基因组中含有一段长约145 kb的独特性序列(U)，其左右同向排列着末端重复序列(DRR 和DRL),该序列长度约8～13kb。

4.基因表达产物

HHV-6基因转录模式符合疱疹病毒科的特征,即立即早期蛋白( IE) —早期蛋白( E) —晚期蛋白(L) 的表达模式。

HHV-6主要的靶细胞为CD4 + T淋巴细胞,也能感染巨细胞、树突状细胞和上皮细胞。不同的分离株对不同的T细胞系的亲嗜性不同。实验室用新生儿脐带血单个核细胞做病毒的分离及传代培养。其培养条件特殊,需在RPMI 1640培养基中加有丝分裂原(如PHA) 、IL22以提高细胞的敏感性。

5.免疫性

HHV-6 主要感染儿童, 3-7 天后就能在血清中查到抗HHV - 6 的抗体, 两周时, IgM 达高峰, 两周后, IgG 开始升高, 90% 儿童及成人均可查到IgG, IgG主要识别gB、gH、gp82- 105 抗原决定基。细胞免疫是机体防御HHV-6 的关键因素, 针对于B- 疱疹病毒的T 细胞克隆分泌的IFN-C, 是抵抗HHV-6 感染的主要因素。N K细胞对于疱疹病毒的感染也是敏感的,N K可分泌IL-15, IL-15能增强N K的杀HHV-6的活性, 也可刺激CD4+ T分泌IFN-C。

HHV-6可以逃避宿主的免疫防御, 因其可损害机体内多种免疫细胞, 主要为CD4+ T。机制为: ①HHV - 6 感染引起细胞发生病变而直接损伤感染细胞; ②TN F- a、Fas 交联诱导细胞发生凋亡③识别抗原肽的CD8+ TL杀死CD4+ T。

HHV-6也能调节炎症反应,HHV- 6能上调IL-18、IL-2R、TN F受体超家族的表达, 也能上调IL- 8 在肝细胞系中表达和粘附分子在肝脏的异体移植中表达, 这些因素在HHV-6感染的过程中均可导致器官特异性炎症的发生。HHV-6在直接感CD4+T, 通过下调相关CXCR4 基因抑制因子(YY1 和CMYC) 的表达而使趋化因子受体CXCR4表达, 继而改变了直接感染细胞的趋化性反应。

 

四．临床意义

1.儿童感染

HHV-6感染在儿童中十分普遍，90%儿童在6个月至2岁时发生HHV -6原发感染，30%的儿童初次感染HHV-6表现为玫瑰疹。玫瑰疹是儿童早期的一种常见传染病，其临床表现为患儿体温突然升高至40℃，２～４天后迅速下降，同时出现红色斑丘疹，首先在颈部、耳后和背部，之后可迅速波及身体其他部位，持续1～3天。如果病程中有发热而未出现惊厥，那么多数儿童呈轻症，很少并发其他的神经症状和脑炎。儿童初次感染也可出现疹而不发热或者发热而不出疹的现象。

2.成人感染

成人初次感染HHV -6很罕见，感染后临床症状可表现为淋巴结炎、单核细胞增多样疾病，偶有肝炎报道。接受器官移植或免疫功能缺陷患者（如：艾滋病）可发生HHV -6重症感染，如脑炎、间质性肺炎等。

五．流行病学特征

HHV-6感染在儿童中广泛存在,可引起幼儿急疹( ES) 等。HHV-6的A、B 两个亚型广泛存在于健康成人及儿童PBMC 和唾液中,但在不同疾病中流行情况有所不同。99 %的HHV-6原发感染为B亚型所致,在ES和骨髓移植患者中主要B亚型,而在艾滋病及淋巴增生性疾病患者中,A亚型的检出率则远高于B亚型,健康人群PBMC中,B亚型毒株感染谱比A亚型广泛。HHV-6感染途径尚不清楚,原发感染后病毒可持续存在于唾液腺以及PBMC中,再激活机制尚不明确, HHV-6能从唾液中检出,提示唾液是可能的传播源。

5.1 幼儿急疹

1988年Yamanishi 等首先证实了HHV-6是幼儿急疹( Exanthum subitum , ES) 的病原体。HHV-6的原发感染多见于6个月至2岁的婴幼儿,感染后大多无临床症状,少数可引起幼儿急疹。幼儿急疹是幼儿常见的热性发疹性疾病,在因发热性疾病而到医院就诊的儿童中占10 %～45 %。临床表现为患儿突然发热, 体温最高达40℃,可持续3～5 d ,退热后于颈部及躯干出现淡红色斑丘疹。偶而亦引起脑炎、重症肝炎、惊厥等合并症。

5.2 AIDS

HHV-6与HIV能在CD4 + T淋巴细胞共同复制,且HHV-6可反式激活HIV的长末端重复序列(L TR)，增强HIV表达, 加速宿主细胞死亡。进一步的实验证明,HHV-6与HIV共同感染正常人CD8 + CD4 - T细胞后,诱导CD4 + T细胞mRNA的表达,通过CD4分子的诱生,扩大HIV的易感细胞范围,从而加强了HIV感染的扩散。此外HHV-6还诱导其感染细胞及邻近非感染细胞释放IFN2α、TNF2α、IL21β等细胞因子或其他生物活性分子,在AIDS相关综合征及AIDS的发展中起一定的致病作用。但HHV-6与HIV 在体内共同感染能否加剧AIDS的发展尚待进一步研究证实。

5.3 器官移植

病毒感染已成为影响移植器官存活和受者性命的关键因素之一。HHV-6是移植患者感染合并症最为重要的感染病毒之一,常导致肺炎、发热、肝炎、脑炎、胃肠出血、视网膜炎等,加重免疫排斥、导致移植失败甚至累及病人性命。HHV-6在骨髓移植患者中感染率为38 %～60 % ,肾移植为38 %～55 % ,肝移植为31 %。大多数患者在移植后2～4周发生感染,这一点与巨细胞病毒感染不同,后者常发生在移植后12周。目前研究认为移植患者发生HHV-6感染的原因主要是体内潜伏感染的病毒再激活所致。其次,器官移植的供者是发生传播的感染源。

5. 4 肿瘤

HHV-6 感染与人类肿瘤的关系尚在研究中,主要集中在淋巴增生性疾病。由于在不同淋巴细胞增生性疾病患者中分离到HHV-6 , 故认为HHV-6可能是人类肿瘤的一个病因。在淋巴瘤

组织中用核酸杂交方法能发现HHV-6基因,但是能否引起细胞转化尚无确切依据。HHV-6可能还与白血病、宫颈癌等肿瘤相关。

5. 5 其他

HHV-6侵犯神经系统可引起无菌性脑膜炎和脑炎。HHV-6 感染还与多发性硬化症、传染性单核细胞增多症、慢性疲劳综合征等有关。

5.6 献血者HHV-6感染的血清流行病学调查

王笃初等采用IFA对湖南省长沙地区252名正常献血者进行了HHV-6 IgG抗体的检测,总阳性率为45. 63 %(115/ 252) ,统计学分析表明HHV-6抗体阳性与性别、血型和年龄无关。RK毒株制成人进行HHV-6 特异性IgG的检测,显示92 %(24/ 26) 的成人HHV-6特异性IgG 同时为阳性( ≥1 ∶160),表明HHV-6在成人中有很高的流行率。

5.7 巢式PCR 检测献血者HHV DNA

Cuende 等应用巢式PCR 对献血者PBMC中的HHV-6 DNA 检测,当反应体系内加入1μg的待测样本DNA时,阳性检出率为40 %(8/ 20) ;当反应体系内加入5μg 的DNA 模板时,阳性率检出则提高到90 %(18/ 20) 。可见健康人群中HHV-6有很高的流行率,但在PBMC 中病毒的含量较低。Cuende 同时结合血清学方法对50名献血者血清HHV-6特异性IgG 和IgM 抗体检测,结果显示IgG 阳性率为34 %(17/ 50) ,未检测到病毒特异性IgM 抗体,表明被检献血者未发生HHV-6新近感染和再激活感染。如果有活动性感染时的病毒DNA复制,病毒DNA可在血清中检测到,而Cuende 在献血者的血清中未检测到HHV-6 DNA阳性结果。Cuende 等的研究结果表明约90 %的成人PBMC中存在较低数量的HHV-6 ,提示病毒可能处在一种潜伏状态。

 

六．实验室诊断

HHV-6 感染的诊断主要依据病毒学、血清学和分子生物学的检测。急性期可采取病儿唾液、外周血淋巴细胞、气管分泌物等分离病毒。快速诊断可通过间接免疫荧光试验。也可用原位杂

交、PCR 技术、免疫印记等检测病毒DNA。

6. 1病毒分离和诊断　

采集和分离患者外周血单个核细胞，与活化的脐带血淋巴细胞或成人外周血淋巴细胞共同培养，每周观察2次有无CPE，出现肿大的气球样细胞提示存在HHV-6感染，可进一步采用抗体外免疫荧光实验检测HHV -6抗原。采用商业化的HHV-6单克隆抗体或特异性探针，可作出准确的HHV-6种特异性鉴定。

6. 2 血清学诊断　

常用的有间接荧光抗体实验、抗补体免疫荧光试验、酶联免疫试验等。检测患者血清中HHV-6种特异性IgM和IgG抗体。IgM抗体通常在感染后5~7出现。IgG抗体在感染后7～10天出现，在急性期和恢复期双份血清中检出抗体滴度4倍或是4倍以上升高具有诊断价值。

6. 3活组织检查　

对于免疫耐受的个体并伴有器官特异性症状的个体敏感性高。

6. 4PCR技术

包括定量PCR、多重PCR、RT -PCR [ 12 ]等, 用于检测HHV- 6DNA。

七．治疗

目前尚无有效的疫苗。人体内产生的干扰素能有效地抑制HHV-6的复制。HHV-6 感染一般为自限性,不需抗病毒治疗, 很少引起器官特异性症状。但如发生脑炎等,则需特异性治疗。丙氧鸟苷、膦甲酸、Cidofovir 均有抗HHV-6的活性。Cidofovir 抑制活性较强, 丙氧鸟苷具有抑制HHV-6A、6B 活性, 但对于HHV-6A 的50%抑毒浓度高于HHV - 6B。膦甲酸对两者均有效, 而无环鸟苷对于该病毒一般无效。有报道, 丙氧鸟苷与膦甲酸联用对有器官特异性症状的免疫抑制患者有效。有研究报道磷甲酸、磷乙酸和更昔洛(ganciclovir) 能有效地抑制HHV-6的复制。但多为离体试验研究,无法对体内药物敏感性作出准确的预测,临床上的应用还很少。

综上所述,HHV-6 感染是普遍存在的, 尽管在临床上对这些病毒在免疫抑制的成人中引起的相关性疾病认识还很少, 但它们对人类依然是一个潜在的致病原。对HHV-6需要进一步认识的问题包括: ①HHV-6 两个亚型之间的区别; ②维持HHV-6 潜伏感染的主要因素; ③与HHV-6 相关的免疫抑制的基础和疾病范围等。最近,HHV-6 两个亚型核酸测序完成,为我们更好地对HHV-6 进行深入的研究奠定了基础。